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Etude de la conservation à 4°C des spermatozoïdes de taureaux dans différents dilueurs

DUMONT P., MAITRE P., GUERIN B.

Laboratoire pour le Contrôle des Reproducteurs

UNCEIA - Services Techniques - 13, rue Jouët - B.P. 65 - 94703 Maisons-Alfort

INTRODUCTION

L’objectif de l’étude est de chercher à conserver les spermatozoïdes de taureau à 4°C sans jaune d’œuf et d’étudier l’influence de la concentration en glycérol dans le dilueur sur leur survie. Huit éjaculats de taureau (un par taureau) ont été récoltés et dilués dans 4 dilueurs : (1) le Triladyl (ND, Minitüb), tampon Tris contenant 20 % de jaune d’œuf et 6,4 % de glycérol, (2) le Biladyl (ND, Minitüb), tampon proche du Triladyl-jaune d’œuf mais préparé avec 2 % de glycérol, (3) le Biociphos Plus (ND, IMV) contenant un substitut de jaune d’œuf et 7 % de glycérol, (4) un Biociphos Plus modifié contenant seulement 2 % de glycérol. Après dilution à 30°C à la concentration de 25 millions de spermatozoïdes par millilitre, la semence a été refroidie en une heure à 4°C puis conditionnée en paillettes de 0,25 ml (IMV). Les paillettes ont été conservées pendant 5 jours à 4°C (de J0 à J4). Quatre évaluations in vitro de la vitalité des spermatozoïdes ont été réalisés quotidiennement : estimation visuelle du pourcentage de spermatozoïdes fléchants (motilité) et de la note de mouvement ; évaluation sur 200 cellules du pourcentage de spermatozoïdes à membrane intègre après coloration au fluorochrome Hoechst 33258 ; évaluation sur 200 cellules du pourcentage de spermatozoïdes à acrosome intègre en microscopie à contraste interférentiel. Les données ont été étudiées, sans transformation, par analyse de variance.

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